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松材線蟲dna快速檢測系統如何實現快速定性?

更新時間:2025-12-29      點擊次數:18

  【JD-XC1】【松材線蟲檢測儀設備選競道科技,野外快檢系統可便攜移動作業,自動顯示檢測結果并打印檢測報告,操作更智能,廠家直發,包教包會,歡迎詢價!】。

  一、特異靶標設計:從源頭杜絕交叉干擾

  系統核心是針對松材線蟲 18S rDNA、ITS 或 COI 等特保守基因,設計高特異性引物與熒光探針(如 TaqMan MGB 探針),僅與松材線蟲 DNA 互補結合,對擬松材線蟲等近緣物種無交叉反應,特異性達 100%。以 qPCR 路線為例,探針 5’端標記 FAM 熒光基團、3’端標記淬滅基團,擴增時 Taq 酶水解探針釋放熒光,實現 “擴增即標記";LAMP/RPA 路線則通過 6 區域引物或重組酶 - 引物復合物,確保僅靶基因被快速富集,從源頭避免假陽性。

松材線蟲dna快速檢測系統

  二、快速擴增技術:恒溫 / 熱循環雙路線提速

  主流系統采用兩類核心擴增技術,大幅壓縮反應時間:

  等溫擴增(LAMP/RPA):LAMP 以 Bst 3.0 聚合酶在 63℃恒溫下實現鏈置換擴增,20 分鐘內完成 10?倍靶基因富集,無需熱循環;RPA 則在 39℃恒溫下,借重組酶 - 單鏈結合蛋白協同作用,15–20 分鐘完成擴增,適配野外無復雜設備場景。

  快速 qPCR:采用高保真 Taq 酶與高效熱循環模塊,升溫速率達 3.5℃/s、降溫速率 2.5℃/s,30–40 個循環僅需 20 分鐘,配合雙熒光通道同步監測靶標與內參,確保結果可靠。

  三、實時信號采集與智能判讀:一鍵出定性結果

  系統通過硬件與算法協同,實現信號快速讀取與自動判定:

  硬件集成化:熒光檢測模塊搭載 CMOS 傳感器或光電二極管陣列,每秒采集數萬次信號,3 秒內完成整板孔位數據讀取,避免逐孔延遲;側流層析(LFD)適配 RPA 產物,通過膠體金標記探針,陽性樣本 10 分鐘內呈現 “雙紅杠",直觀易讀。

  算法自動化:內置 AI 質控模型,實時過濾非特異性擴增信號,通過 Ct 值閾值(如 Ct≤35 判定陽性)或熒光曲線拐點自動判讀,同步校驗內參基因信號,假陰性率控制在 0.3% 以下,符合 LY/T 2933-2018 標準。

  四、極簡樣本前處理:5 分鐘釋放核酸,適配野外快檢

  系統配套專用裂解液與預制試劑卡,省去實驗室離心、純化等步驟:1 克木屑樣本剪碎后放入裂解液,沸水浴 5 分鐘即可釋放 DNA;部分型號采用磁珠法快速吸附核酸,10 分鐘內完成純化,去除木材多酚、腐殖酸等干擾物,確保擴增效率。試劑常溫儲存有效期達 12 個月,無需冷鏈運輸,適配林區無低溫條件的場景。

  五、全流程協同:30–60 分鐘完成定性閉環

  從采樣到出結果的全流程被壓縮至 30–60 分鐘:采樣→5 分鐘樣本處理→10 分鐘核酸提取→20 分鐘擴增→5 分鐘信號判讀,全程無需專業分子操作背景,森防人員經 1 天培訓即可 “一鍵檢測"。數據同步生成帶定位與時間戳的報告,支持 4G / 藍牙上傳至云端,助力快速劃定疫區范圍。

  綜上,該系統通過分子技術優化與軟硬件集成,實現松材線蟲 DNA 快速定性,已成為口岸檢疫、林區普查的核心裝備,檢測結果獲林業部門認可。


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